超高圧液相色譜法同時測定聚碳酸酯食品包裝材料中2-叔丁基苯酚等五種酚類化合物的方法研究。以甲醇為溶劑，分別制備五種酚類化合物標準曲線，過有機濾膜(0.22 μm)后分別采用FLD檢測器和DAD檢測器進行分析。結果表明，采用HPLC-FLD法，對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L范圍內的線性良好，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L范圍內的線性良好，五種酚類化合物的檢出限為0.071 mg/L~0.371 mg/L，在5個加標水平下加標回收率為97.5%~102.3%，相對標準偏差為0.91%~1.1%。采用HPLC-DAD法，五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L范圍內的線性良好，五種酚類化合物的檢出限為0.238 mg/L~0.477 mg/L，在20個加標水平下加標回收率為103.2%~111.7%，相對標準偏差為2.0%~2.6%。說明HPLC-FLD法比HPLC-DAD法表現出更高的靈敏度，這兩種方法均可用于聚碳酸酯食品包裝材料中五種酚類化合物的快速檢測。
Figure 1. Standard spectra of five phenolic compounds
圖1. 五種酚類化合物的標準譜圖
3.1.2. 檢測器
將相同濃度的五種酚類混合標準溶液分別用二極管陣列檢測器(DAD)和熒光檢測器(FLD)進行測定，結果表明：采用激發波長200 nm，發射波長在312 nm的FLD檢測器時，選擇性好，靈敏度更高，故選擇FLD檢測器。
DAD檢測器采用全波長掃描形式，利用被分析物的紫外光譜圖，確定其最大吸收波長。
通過3D掃描發現，在195 nm下，五種酚類物質均有最大吸收，最終確認在波長195 nm下進行分析。其流動相與液相方法均與FLD相同。
3.2. 校準曲線的線性方程和檢出限
3.2.1. 采用HPLC-FLD法
基于優化后的色譜條件，考察了對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L濃度范圍內的線性關系及相關系數，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L濃度范圍內的線性關系及相關系數，結果表明對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L濃度范圍內的線性關系良好，相關系數不低于0.9993，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L濃度范圍內的線性關系良好，相關系數不低于0.9975，其線性方程、相關系數、檢出限(IDL、MDL)見表1。
Analyte name | Linearity rang/(mg/L) | Linear equations | R | IDL (mg/L) | MDL (mg/L) |
對叔丁基苯酚 | 0.05~5 | y = 31570x + 2665 | 0.9995 | 0.015 | 0.071 |
2-叔丁基苯酚 | 0.05~5 | y = 43332x + 2470 | 0.9996 | 0.016 | 0.057 |
4-叔辛基苯酚 | 0.05~5 | y = 59099x + 3435 | 0.9993 | 0.016 | 0.086 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 0.1~10 | y = 28803x + 2118 | 0.9975 | 0.032 | 0.371 |
4-肉桂苯酚 | 0.1~10 | y = 39371x + 337 | 0.9987 | 0.024 | 0.106 |
Table 1. Linear equation, correlation coefficient and detection limit of five phenolic compounds by HPLC-FLD method
表1. HPLC-FLD法中5種酚類化合物的線性方程、相關系數、檢出限
3.2.2. 采用HPLC-DAD法
基于優化后的色譜條件，考察了對五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L濃度范圍內的線性關系及相關系數，結果表明五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L濃度范圍內的線性關系良好，相關系數不低于0.9989，其線性方程、相關系數、檢出限(IDL、MDL)見表2。
Analyte name | Linearity rang/(mg/L) | Linear equations | R | IDL (mg/L) | MDL (mg/L) |
對叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.2385x + 0.0814 | 0.9993 | 0.122 | 0.304 |
2-叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.4434x + 0.0788 | 0.9998 | 0.202 | 0.238 |
4-肉桂苯酚 | 1~20 | y = 0.4776x + 0.4440 | 0.9993 | 0.520 | 0.274 |
4-叔辛基苯酚 | 1~20 | y = 0.1685x + 0.2468 | 0.9989 | 0.108 | 0.477 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.3226x + 0.2878 | 0.9984 | 0.140 | 0.349 |
Table 2. Linear equation, correlation coefficient and detection limit of five phenolic compounds by HPLC-DAD method
表2. HPLC-DAD法中5種酚類化合物的線性方程、相關系數、檢出限
3.3. 回收率及精密度
3.3.1. 采用HPLC-FLD法
向空白試劑中添加5個濃度水平的對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚混合標準溶液，平行測定7次，計算加標回收率和相對標準偏差(RSD)，結果如表3，對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚的加標回收率分別為101.2%，102.3%，97.5%，98.7%、101.5%；RSD分別為1.0，1.0，1.1，0.95，0.91。
Analyte name | Added/(μg/L) | Found (μg/L) | Recovery/% | RSD/% |
對叔丁基苯酚 | 5 | 5.060 | 101.2 | 1.0 |
2-叔丁基苯酚 | 5 | 5.115 | 102.3 | 1.0 |
4-肉桂苯酚 | 5 | 5.074 | 101.5 | 0.91 |
4-叔辛基苯酚 | 5 | 4.873 | 97.5 | 1.1 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 5 | 4.933 | 98.7 | 0.95 |
Table 3. Recovery and relative standard deviation of standard solution by HPLC-FLD method (n = 7)
表3. HPLC-FLD法中標準溶液的回收率與相對標準偏差(n = 7)
3.3.2. 采用HPLC-DAD法
向空白試劑中添加20個濃度水平的對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚混合標準溶液，平行測定7次，計算加標回收率和相對標準偏差(RSD)，結果如表4，對叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚的加標回收率分別為109.0%，105.8%，103.2%，111.2%、111.7%；RSD分別為2.3，3.0，2.6，2.0，2.5。
Analyte name | Added/(μg/L) | Found (μg/L) | Recovery/% | RSD/% |
對叔丁基苯酚 | 20 | 21.802 | 109.0 | 2.3 |
2-叔丁基苯酚 | 20 | 21.168 | 105.8 | 3.0 |
4-叔辛基苯酚 | 20 | 20.643 | 103.2 | 2.6 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 20 | 22.242 | 111.2 | 2.0 |
4-肉桂苯酚 | 20 | 22.348 | 111.7 | 2.5 |
Table 4. Recovery and relative standard deviation of standard solution by HPLC-DAD method (n = 7)
表4. HPLC-DAD法中標準溶液的回收率與相對標準偏差(n = 7)
4. 結論
建立了超高壓液相色譜法同時測定聚碳酸酯食品包裝材料中五種酚類物質的方法研究。研究發現，HPLC-FLD法比HPLC-DAD法表現出更高的準確度和精密度。兩種方法均快速、簡便、相比國標方法大大縮短了檢測周期，大幅提高工作效率。在滿足基層檢測室需要的基礎上，同時滿足各類監督抽查及委托檢驗任務，對有條件的企業進行應用，為我國廣大食品接觸材料生產企業的原料把關及成品質量控制提供了簡單可靠的分析方法。
客服1