超高圧液相色譜法同時(shí)測(cè)定聚碳酸酯食品包裝材料中2-叔丁基苯酚等五種酚類化合物的方法研究。以甲醇為溶劑，分別制備五種酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線，過(guò)有機(jī)濾膜(0.22 μm)后分別采用FLD檢測(cè)器和DAD檢測(cè)器進(jìn)行分析。結(jié)果表明，采用HPLC-FLD法，對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L范圍內(nèi)的線性良好，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L范圍內(nèi)的線性良好，五種酚類化合物的檢出限為0.071 mg/L~0.371 mg/L，在5個(gè)加標(biāo)水平下加標(biāo)回收率為97.5%~102.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.91%~1.1%。采用HPLC-DAD法，五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L范圍內(nèi)的線性良好，五種酚類化合物的檢出限為0.238 mg/L~0.477 mg/L，在20個(gè)加標(biāo)水平下加標(biāo)回收率為103.2%~111.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.0%~2.6%。說(shuō)明HPLC-FLD法比HPLC-DAD法表現(xiàn)出更高的靈敏度，這兩種方法均可用于聚碳酸酯食品包裝材料中五種酚類化合物的快速檢測(cè)。
Figure 1. Standard spectra of five phenolic compounds
圖1. 五種酚類化合物的標(biāo)準(zhǔn)譜圖
3.1.2. 檢測(cè)器
將相同濃度的五種酚類混合標(biāo)準(zhǔn)溶液分別用二極管陣列檢測(cè)器(DAD)和熒光檢測(cè)器(FLD)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明：采用激發(fā)波長(zhǎng)200 nm，發(fā)射波長(zhǎng)在312 nm的FLD檢測(cè)器時(shí)，選擇性好，靈敏度更高，故選擇FLD檢測(cè)器。
DAD檢測(cè)器采用全波長(zhǎng)掃描形式，利用被分析物的紫外光譜圖，確定其最大吸收波長(zhǎng)。
通過(guò)3D掃描發(fā)現(xiàn)，在195 nm下，五種酚類物質(zhì)均有最大吸收，最終確認(rèn)在波長(zhǎng)195 nm下進(jìn)行分析。其流動(dòng)相與液相方法均與FLD相同。
3.2. 校準(zhǔn)曲線的線性方程和檢出限
3.2.1. 采用HPLC-FLD法
基于優(yōu)化后的色譜條件，考察了對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系及相關(guān)系數(shù)，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系及相關(guān)系數(shù)，結(jié)果表明對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚三種酚類在0.05 mg/L~5 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)不低于0.9993，2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚兩種酚類在0.1 mg/L~10 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)不低于0.9975，其線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限(IDL、MDL)見(jiàn)表1。
Analyte name | Linearity rang/(mg/L) | Linear equations | R | IDL (mg/L) | MDL (mg/L) |
對(duì)叔丁基苯酚 | 0.05~5 | y = 31570x + 2665 | 0.9995 | 0.015 | 0.071 |
2-叔丁基苯酚 | 0.05~5 | y = 43332x + 2470 | 0.9996 | 0.016 | 0.057 |
4-叔辛基苯酚 | 0.05~5 | y = 59099x + 3435 | 0.9993 | 0.016 | 0.086 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 0.1~10 | y = 28803x + 2118 | 0.9975 | 0.032 | 0.371 |
4-肉桂苯酚 | 0.1~10 | y = 39371x + 337 | 0.9987 | 0.024 | 0.106 |
Table 1. Linear equation, correlation coefficient and detection limit of five phenolic compounds by HPLC-FLD method
表1. HPLC-FLD法中5種酚類化合物的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限
3.2.2. 采用HPLC-DAD法
基于優(yōu)化后的色譜條件，考察了對(duì)五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系及相關(guān)系數(shù)，結(jié)果表明五種酚類化合物在1 mg/L~20 mg/L濃度范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)不低于0.9989，其線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限(IDL、MDL)見(jiàn)表2。
Analyte name | Linearity rang/(mg/L) | Linear equations | R | IDL (mg/L) | MDL (mg/L) |
對(duì)叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.2385x + 0.0814 | 0.9993 | 0.122 | 0.304 |
2-叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.4434x + 0.0788 | 0.9998 | 0.202 | 0.238 |
4-肉桂苯酚 | 1~20 | y = 0.4776x + 0.4440 | 0.9993 | 0.520 | 0.274 |
4-叔辛基苯酚 | 1~20 | y = 0.1685x + 0.2468 | 0.9989 | 0.108 | 0.477 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 1~20 | y = 0.3226x + 0.2878 | 0.9984 | 0.140 | 0.349 |
Table 2. Linear equation, correlation coefficient and detection limit of five phenolic compounds by HPLC-DAD method
表2. HPLC-DAD法中5種酚類化合物的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限
3.3. 回收率及精密度
3.3.1. 采用HPLC-FLD法
向空白試劑中添加5個(gè)濃度水平的對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)定7次，計(jì)算加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，結(jié)果如表3，對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚的加標(biāo)回收率分別為101.2%，102.3%，97.5%，98.7%、101.5%；RSD分別為1.0，1.0，1.1，0.95，0.91。
Analyte name | Added/(μg/L) | Found (μg/L) | Recovery/% | RSD/% |
對(duì)叔丁基苯酚 | 5 | 5.060 | 101.2 | 1.0 |
2-叔丁基苯酚 | 5 | 5.115 | 102.3 | 1.0 |
4-肉桂苯酚 | 5 | 5.074 | 101.5 | 0.91 |
4-叔辛基苯酚 | 5 | 4.873 | 97.5 | 1.1 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 5 | 4.933 | 98.7 | 0.95 |
Table 3. Recovery and relative standard deviation of standard solution by HPLC-FLD method (n = 7)
表3. HPLC-FLD法中標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 7)
3.3.2. 采用HPLC-DAD法
向空白試劑中添加20個(gè)濃度水平的對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)定7次，計(jì)算加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)，結(jié)果如表4，對(duì)叔丁基苯酚、2-叔丁基苯酚、4-叔辛基苯酚、2,4-二叔丁基苯酚、4-肉桂苯酚的加標(biāo)回收率分別為109.0%，105.8%，103.2%，111.2%、111.7%；RSD分別為2.3，3.0，2.6，2.0，2.5。
Analyte name | Added/(μg/L) | Found (μg/L) | Recovery/% | RSD/% |
對(duì)叔丁基苯酚 | 20 | 21.802 | 109.0 | 2.3 |
2-叔丁基苯酚 | 20 | 21.168 | 105.8 | 3.0 |
4-叔辛基苯酚 | 20 | 20.643 | 103.2 | 2.6 |
2,4-二叔丁基苯酚 | 20 | 22.242 | 111.2 | 2.0 |
4-肉桂苯酚 | 20 | 22.348 | 111.7 | 2.5 |
Table 4. Recovery and relative standard deviation of standard solution by HPLC-DAD method (n = 7)
表4. HPLC-DAD法中標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 7)
4. 結(jié)論
建立了超高壓液相色譜法同時(shí)測(cè)定聚碳酸酯食品包裝材料中五種酚類物質(zhì)的方法研究。研究發(fā)現(xiàn)，HPLC-FLD法比HPLC-DAD法表現(xiàn)出更高的準(zhǔn)確度和精密度。兩種方法均快速、簡(jiǎn)便、相比國(guó)標(biāo)方法大大縮短了檢測(cè)周期，大幅提高工作效率。在滿足基層檢測(cè)室需要的基礎(chǔ)上，同時(shí)滿足各類監(jiān)督抽查及委托檢驗(yàn)任務(wù)，對(duì)有條件的企業(yè)進(jìn)行應(yīng)用，為我國(guó)廣大食品接觸材料生產(chǎn)企業(yè)的原料把關(guān)及成品質(zhì)量控制提供了簡(jiǎn)單可靠的分析方法。
客服1